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組織多肽抗原（TPA）

基本信息

  • ?？品诸悾?/b> 腫瘤科
  • 檢查分類： 其他檢查
  • 適用性別： 男女均適用
  • 是否空腹： 　空腹
  • 手術(shù)參考價(jià)： 24元
  • 科　室： 腫瘤科

組織多肽抗原（TPA）檢查簡介

組織多肽抗原(TPA)的分子量17,000～43,000，由B1、B2和C三個亞基組成，其活性主要在B1。TPA主要存在于胎盤和大部分腫瘤組織中，各種惡性腫瘤(卵巢癌、結(jié)腸癌、直腸癌、肝細(xì)胞癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、子宮內(nèi)膜癌、睪丸腫瘤等)患者血清TPA的檢出率(以>130U/L血清為陽性)可從20%至90%，有人認(rèn)為高達(dá)80%～100%，它的存在與腫瘤發(fā)生部位、組織類型均無相關(guān)性。

組織多肽抗原（TPA）檢查過程

本法分三個步驟，即抗原與抗體反應(yīng)、B和F分離和放射性測定。

（1）抗原與抗體反應(yīng)，將標(biāo)本（非標(biāo)記抗原）、標(biāo)記抗原和抗血清順序定量加入小試管內(nèi)，置室溫（15～30℃）作用24h，使其充分競爭結(jié)合。

（2）B、F分離：分離技術(shù)多種多樣，常用沉淀法。①第二抗體沉淀法：又稱雙抗體法，在受檢抗原與第一抗體特異性反應(yīng)后加入相應(yīng)的第二抗體，使形成的抗原-第一抗體-第二抗體的復(fù)合物共沉，一經(jīng)離心即可使結(jié)合標(biāo)記抗原B與游離抗原F分離。本法是特異性沉淀，分離完全，非特異性結(jié)合力低。但第二抗體用量較大，成本較高。此外血清濃度、抗凝劑的有無因素可在一定程度上影響結(jié)果。②聚乙二醇（PEG）沉淀法：使蛋白質(zhì)處于等電點(diǎn)狀態(tài)，水化層破壞而導(dǎo)致蛋白質(zhì)沉淀。本法優(yōu)點(diǎn)是PEG制備方便、價(jià)廉、分離快速，缺點(diǎn)是非特異沉淀物較多，分離不完全。③第二抗體-聚乙二醇沉淀法：本法既有PEG法的快速沉淀優(yōu)點(diǎn)，且保持第二抗體特異性沉淀的作用，又減少第二抗體用量，并降低PEG濃度，使非特異沉淀物減少。④活性炭吸附法：利用活性炭表面活性將小分子的游離部分吸附。如在活性炭表面涂上一層葡聚糖，使它表面具有一定孔徑的網(wǎng)眼，從而允許小分子游離抗原或半抗原逸入而被吸附，而大分子復(fù)合物則被排斥在外。在抗原與抗體反應(yīng)后，加入葡聚糖-活性炭，放置5～10min，使游離抗原吸附在活性炭顆粒上，離心使顆粒沉淀，上清液中含有結(jié)合的標(biāo)記抗原。

（3）放射性強(qiáng)度測定：B和F分離后，即可測定其放射性強(qiáng)度。測量儀器有兩類：液體閃爍計(jì)數(shù)儀（測β射線）和晶體閃爍計(jì)數(shù)儀（測γ射線）。計(jì)數(shù)單位是探測器輸出的電脈沖數(shù)，單位為cpm（脈沖數(shù)/min）。

每次測定均需作一標(biāo)準(zhǔn)曲線圖，以標(biāo)準(zhǔn)抗原的不同濃度為橫坐標(biāo)，以測到的相應(yīng)放射性強(qiáng)度為縱坐標(biāo)作圖。放射性強(qiáng)度可任選B或F，亦可采用計(jì)算值B/B＋F、B/F或B/B0。標(biāo)本應(yīng)作雙份測定，取其平均值，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的受檢抗原濃度。

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