獲得性血友病檢查
1.激活的部分凝血活酶時(shí)間(APTT)、凝血酶原時(shí)間(PT)和血小板功能檢查
當(dāng)APTT延長(zhǎng)、PT和血小板功能正常時(shí)應(yīng)考慮有無(wú)自身抗體存在，是檢查自身抗體的篩選試驗(yàn)。
2.血漿混合試驗(yàn)
當(dāng)僅有APTT延長(zhǎng)時(shí)，應(yīng)進(jìn)行血漿混合試驗(yàn)測(cè)定APTT以確定抗體的存在。如APTT仍延長(zhǎng)5s或以上為抗體存在。當(dāng)內(nèi)凝血途徑某一因子(FⅫ、FⅪ、FⅨ、FⅧ)缺乏時(shí)，正常血漿與患者血漿等量混合可糾正延長(zhǎng)的APTT;但是，當(dāng)有抗體存在時(shí)，等量血漿混合后延長(zhǎng)的APTT、不能得到糾正。對(duì)于低滴度抗體，需將患者血漿與正常血漿在37℃共同孵育1～2h，以增強(qiáng)自身抗體對(duì)FⅧ的作用(以時(shí)間和溫度依賴的方式)。因?yàn)楦叩味鹊腇Ⅷ自身抗體能非特異性地抑制內(nèi)凝途徑中的凝血因子(FⅨ、FⅪ、FⅫ)，所以需要把患者血漿系列稀釋并與未稀釋的正常血漿混合進(jìn)行試驗(yàn)。由于抗體被稀釋，F(xiàn)Ⅻ、FⅪ、FⅨ的活性正常，而FⅧ：C仍被抑制。
3.Bethesda試驗(yàn)
一旦確定存在自身抗體，就應(yīng)對(duì)抗體進(jìn)行定量以評(píng)估出血的嚴(yán)重程度和危險(xiǎn)性。常用的方法是Bethesda法，即檢測(cè)患者血漿滅活正常血漿中FⅧ的能力。一個(gè)Bethesda單位定義為檢測(cè)體系中剩余FⅧ活性為50%時(shí)的患者血漿稀釋度。但是，該方法缺乏敏感性尤其是當(dāng)抗體為低滴度時(shí)。此外，Bethesda法是為檢測(cè)在HA患者中出現(xiàn)的同種抗體而建立的，用于AH患者檢測(cè)自身抗體不是一個(gè)理想的方法。但是，用此法進(jìn)行自身抗體的定量對(duì)低滴度自身抗體患者出血的嚴(yán)重性仍有預(yù)測(cè)作用。
4.改良Bethesda試驗(yàn)
即將患者血漿與緩沖液稀釋后的正常人血漿共同溫育以保證體系pH值的恒定，同時(shí)將緩沖液稀釋后的正常人血漿與乏FⅧ血漿一起溫育作為對(duì)照。改良法提高了敏感性，尤其適合用于低滴度抗體的檢測(cè)。因此，被推薦為檢測(cè)抑制性抗體的首選方法。但是，與Bethesda法一樣，該法不能檢測(cè)非抑制性FⅧ抗體，所用的缺如FⅧ的血漿中不應(yīng)有FⅧ抗體;同時(shí)對(duì)照和混合的血漿應(yīng)是同一來(lái)源。
5.ELISA法
用重組FⅧ包被，4℃過(guò)夜;魚(yú)膠封閉非特異性位點(diǎn)，加入經(jīng)稀釋的患者血漿并37℃孵育;再加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的兔抗人IgG，四甲基二氫氯化聯(lián)苯胺(TMB)作為發(fā)色底物，鹽酸終止反應(yīng)，450nm處測(cè)吸光度(A)。該方法能檢測(cè)所有抗FⅧ抗體，包括抑制性和非抑制性的自身抗體和同種抗體。其敏感性是Bethesda法的10倍。但是，該法在檢測(cè)時(shí)用作標(biāo)準(zhǔn)抗原的FⅧ來(lái)源對(duì)抗體檢出的敏感性有很大影響，用重組FⅧ做抗原時(shí)檢出率最高;用血漿來(lái)源的FⅧ因含高水平的血管性血友病因子(vWF)，檢出率最低。所以臨床上在檢測(cè)FⅧ抗體時(shí)應(yīng)用重組FⅧ做抗原。
6.免疫沉淀法(IP)
患者稀釋血漿與125I標(biāo)記的FⅧ分子的A1、A2、C2、輕鏈片段共同孵育后，再加入蛋白G-sephrose結(jié)合的磁珠;用γ計(jì)數(shù)儀測(cè)定結(jié)合的放射活性;結(jié)果表示為免疫沉淀單位/ml，計(jì)算公式為：1-(結(jié)合放射活性/總放射活性一背景放射活性)×血漿稀釋倍數(shù)×16.7。該方法的敏感性和特異性與ELISA相同，也能檢測(cè)所有抗FⅧ抗體，包括抑制性和非抑制性的自身抗體和同種抗體。臨床上，在檢測(cè)FⅧ抗體時(shí)應(yīng)同時(shí)進(jìn)行Bethesda和ELISA法或IP法檢測(cè)。
7.FⅧ：
C檢測(cè) 一期法不能判定FⅧ：C減低是因FⅧ自身抗體還是狼瘡抗凝物質(zhì)引起。二期法則可鑒別，因在狼瘡抗凝物質(zhì)存在時(shí)FⅧ：C水平正?；蛏踔猎黾?也可用血小板中和試驗(yàn)或稀釋的RVVT來(lái)鑒別。
根據(jù)病情，臨床表現(xiàn)、癥狀、體征選擇做心電圖、B超、X線、CT、MRI、生化等檢查。
